层析柱
发布日期：2019-02-09 18:20:06编辑：音乐人
概括：这道题是周疤拥同学的课后生物练习题，主要是关于层析柱，指导老师为刁老师。层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。
题目：层析柱
解：简单洗脱：始终用同一种洗脱剂洗脱,凝胶层析多采用这种洗脱方式.如果各组分对固定相的亲和力差异不大,其区带的洗脱时间间隔也不长,采用这种方法较为适宜.但要注意必须选择合适的溶剂,才能使各组分的分配系数较大.
阶段洗脱：该方法按照洗脱能力递增的顺序排列,用不同的洗脱液逐级洗脱.它主要对混合物组成简单、各组分性质差异较大或需快速分离的物质适用.每次用一种洗脱液将其中一种组分快速洗脱下来.
梯度洗脱：当混合物中组分复杂且性质差异较小时,应采用梯度洗脱.它的洗脱能力是逐步连续增加的,梯度可以指浓度、极性、离子强度或pH等.常用的是浓度梯度,在溶液中也就是离子强度梯度.
举一反三
例1： 【层析柱洗脱液流下速度太是什么原因怎么办我用的是甲醇：水80:20的淋洗液,分离真菌毒素,但是管子里填了10ml的硅胶后,淋洗液半天才滴一滴,管子直径2cm吧,是硅胶装多了?硅胶之前要不要活】[物理练习题]
思路提示：
恒流泵的转速调快一点就可以了,或者你没有用恒流泵?那液体流速就基本靠重力,很慢很慢了
例2： 柱层析为什么要当洗脱液降到滤纸面时再加滤液[数学练习题]
思路提示：
因为如果一次加入太多的洗脱液,一个是不能容下很多的洗脱液
更重要的原因是要控制洗脱的速度,必须较慢,如果太快则洗脱的效果很好.、希望对你有用
例3： 【使用硅胶柱层析的硅胶分离同样的样品,洗脱结束后,可以在此硅胶柱上继续上样吗?能重复上样几次】
思路提示：
实验室实在没条件,我觉得可以重复使用的,但是在使用前我觉得应该用极性高于洗脱液极性的洗脱剂清洗,好洗脱上次样品中的杂质.
相关思考练习题：
题1：柱层析怎么选择洗脱剂
点拨：尽量从极性或者阴阳离子角度去考虑 如果使用的是非离子层析填料就只考虑溶剂的极性就可以了，很多时候复杂的情况下是可以使用混配溶剂的（这样洗脱剂可以达到很精确的区间）
题2：层析柱的高径比如何影响树脂分离效果
点拨：理论上来说高经比越大，树脂分离效果越好（即塔板数越多）。 层析柱的直径大小不影响分离度，样品用量大，可加大柱的直径，一般制备用凝胶柱，直径大于2厘米，但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外， 直径加大，洗脱液体体积增大，样...
题3：柱层析为了达到良好的分离效果，装柱时应注意什么...
点拨：装柱方法分为湿法和干法，一般来说，湿法装柱的效果优于干法装柱。 湿法装柱： 先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中，使之处于有机环境。装柱时在层析柱自下而上依次填入硅烷花玻璃棉→石英砂→已处理好的层析填料，一边装柱一边用...
题4：层析柱如何来选择，玻璃层析柱与和加压层析柱的优...
点拨：层析柱是凝胶层析技术中的主体，我们研究所用的就是同兴玻璃仪器，一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同，从而分离的一种层析法。 层析柱是凝胶层析技术中的主体，一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱...
题5：层析柱的中压分离层析柱操作方法
点拨：以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例 以一定比例的石油醚一丙酮为洗脱液，60ML/MIN的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～ 3KG/C 。按每份500ML收集，TLC检识展开剂丙酮一氯仿(2：8)，显色剂5%香草醛浓硫酸乙醇液至洗脱完全，相同流份合并，回...