培养基

概括：这道题是贤图弥同学的课后生物练习题，主要是关于培养基，指导老师为侯老师。

题目：培养基

　　培养基

　　培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素.

　　按所用原料不同,可分为两类：应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基；应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基.化学试剂中的培养基,大多为合成培养基.由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末.培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同.一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存.对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基）,较长时间的贮存,必须放在2~6.C的冰箱内.

　　常见培养基有：

　　1、细菌培养基

　　配方一 牛肉膏琼脂培养基

　　牛肉膏0.3克 ,蛋白胨1.0克,氯化钠 0.5克,琼脂 1.5克,

　　水 100毫升

　　在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热.待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底.等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌30分钟.

　　配方二 马铃薯培养基

　　取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨.在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时.过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右.每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用.

　　配方三 根瘤菌培养基

　　葡萄糖 10克 磷酸氢二钾 0.5克

　　碳酸钙 3克 硫酸镁 0.2克

　　酵母粉 0.4克 琼脂 20克

　　水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升

　　先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用.

　　2、放线菌培养基

　　配方一 淀粉琼脂培养基（高氏培养基）

　　可溶性淀粉 2克 硝酸钾 0.1克

　　磷酸氢二钾 0.05克 氯化钠 0.05克

　　硫酸镁 0.05克 硫酸亚铁 0.001克

　　琼脂 2克 水 100毫升

　　先把淀粉放在烧杯里,用5毫升水调成糊状后,倒入95毫升水,搅匀后加入其他药品,使它溶解.在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水.调整pH值到7.2～7.4,分装后灭菌,备用.

　　配方二 面粉琼脂培养基

　　面粉 60克 琼脂 20克

　　水 1000毫升

　　把面粉用水调成糊状,加水到500毫升,放在文火上煮30分钟.另取500毫升水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用.

　　3、真菌培养基

　　配方一 萨市（Sabouraud’s）培养基

　　蛋白胨 10克 琼脂 20克

　　麦芽糖 40克 水 1000毫升

　　先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖（或葡萄糖）,搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用.

　　本培养菌是培养许多种类真菌所常用的.

　　配方二 马铃薯糖琼脂培养基

　　把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分.在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克（用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖）,补足水分,分装,灭菌,备用.

　　把这培养基的pH值调到7.2～7.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌.

　　配方三 黄豆芽汁培养基

　　黄豆芽 100克 琼脂 15克

　　葡萄糖 20克 水 1000毫升

　　洗净黄豆芽,加水煮沸30分钟.用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补足水分到1000毫升,分装,灭菌,备用.

　　把这培养基的pH值调到7.2～7.4,可用来培养细菌和放线菌.

　　配方四 豌豆琼脂培养基

　　豌豆 80粒 琼脂 5克

　　水 200毫升

　　取80粒干豌豆加水,煮沸1小时,用纱布过滤后,在滤液中加入琼脂,煮沸到溶解,分装,灭菌,备用.

　　4、食用菌菌种培养基

　　配方一 马铃薯—蔗糖--琼脂培养基

　　20%马铃薯煮汁 1000毫升

　　蔗糖 20克 琼脂 18克

　　把马铃薯洗净去皮后,切成小块.称取马铃薯小块200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后,过滤.在滤汁中补足水分到1000毫升,即成20%马铃薯煮汁.在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖,煮沸,使它溶解后,补足水分,分装,灭菌,备用.使用该培养基对pH值要求不严格,可以不测定.

　　配方二 综合马铃薯培养基

　　20%马铃薯煮汁 1000 毫升

　　磷酸二氢钾 3克 硫酸镁 1.5克

　　葡萄糖 20克 维生素 10毫克

　　琼脂 18克

　　先配制20%马铃薯煮汁,方法同上.在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6.分装,灭菌,备用. 该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种.

　　5.烟草的培养基

　　在植物组织培养时,通过调节IAA和CTK的比值能影响愈伤组织分化出根或芽.CTK/IAA高时,愈伤组织分化芽

　　CTK/IAA低时,分化根;CTK/IAA比例适中维持愈伤组织不分化

　　愈伤组织诱导培养基制备

　　以MS培养基母液为基础,向洁净铝锅中顺序加入大量元素20×母液100mL,微量元素100×母液20mL,铁盐100×母液20mL ,维生素100×母液20mL,肌醇200×母液10mL,甘氨酸200×母液10mL,配制得MS培养基后,再加入0.5mg·L-1的BA8mL,0.5mg·L-1的NAA8mL.然后加入实际配制培养基体积约2/3-3/4的蒸馏水,加入40g蔗糖后搅拌使其溶化,用0.5mol·L-1的NaOH和0.5 mol·L-1的HCl调整pH值至5.8-6.0.加入14g琼脂,将铝锅置于电炉上,搅拌加热使琼脂完全溶化,然后用蒸馏水定容至终体积2L,继续加热几分钟使之混合均匀后分装于三角瓶中.

　　烟草叶片愈伤组织诱导

　　取一无菌培养皿,用解剖刀切取1-2片无菌苗叶片置于无菌培养皿中,并用解

　　剖刀将叶片切成2mm2左右的小片,然后将其接种于准备好的培养基上,每瓶接种

　　5小片,一共接种6瓶.接种后的三角平置于24条件下黑暗培养1周,然后在同

　　样温度下有光照和全黑暗下培养3周直至愈伤组织形成(两种情况各置3瓶).观

　　察愈伤组织诱导结果,统计愈伤组织诱导率.

　　器官分化及植株再生培养

　　将诱导的愈伤组织按类型分别转入分化培养基上,置于连续光照,温度20-22 C条件下培养3周,统计愈伤组织再生植株情况.

　　愈伤组织诱导的总体情况

　　烟草愈伤组织诱导培养4周后,愈伤组织基本形成,即排除因生长时间不够而

　　未形成愈伤的情况.具体情况见表一中所示,6瓶培养物均有愈伤形成,且都未发

　　生污染,但诱导率几乎各不相同.其中, 在光照条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为

　　60.0℅, 在黑暗条件下培养的3瓶平均愈伤诱导率为46.7%.由于实验过程中,外植

　　体即烟草叶片取得偏小,接种时可能已有部分外植体的大部分细胞脱水死亡,使整

　　个实验的愈伤组织诱导率偏低,愈伤块偏小.

　　特殊培养基：

　　一 选择性培养基

　　1酵母菌富集培养基

　　葡萄糖5% 尿素0.1% 硫化铵0.1% 磷酸二氢钾0.25% 磷酸氢二钠0.05% 七水合硫酸镁0.1% 七水合硫酸铁0.01% 酵母膏0.05%

　　孟加拉红0.003% pH4.5

　　2 Ashby无氮培养基 富集好养自生固氮菌

　　甘露醇1% 磷酸二氢钾0.02% 七水合硫酸镁0.02% 氯化钠0.02%

　　二水合硫酸钙0.01% 碳酸钙0.5%

　　二 鉴别培养基

　　EMB培养基,常用于鉴别E.coli

　　蛋白胨 10g 乳糖5g 蔗糖5g 磷酸氢二钾2g 伊红Y 0.4g 美蓝0.065g

　　蒸馏水1000g pH7.2

　　分离海洋微生物的培养基配方

　　2216E培养基配方（固体培养基）

　　蛋白胨 5克

　　酵母膏 1克

　　磷酸高铁 0.01克

　　琼脂 15-----20克

　　陈海水 1000毫升

　　煮沸氢氧化纳（5%）的溶液调PH值7.6—7.8

举一反三

例1： 微生物培养基到底是什么概念

楼上的说的都很对,我想针对微生物学上,或者说实验室里对微生物培养基的定义,再补充一下.

通常,培养基分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基,微生物培养基则是指的,含有不同成分的用以支持微生物生长的液体或固体.每种培养基根据所培养的微生物种类不同、培养目的不同,添加不同的成分.但全都应含有基本的水、碳源、氮源和盐类.一般碳源的主要形式是糖类,常见的如葡萄糖、蔗糖等；氮源则是含有NH4+或NO3-的各种盐类,盐类同时还提供微生物生长必需的元素,如磷、硫、镁、铁等等.含有相同成分的固体培养基和液体培养基的区别,只是添加了琼脂,以维持胶状的固体培养基形态.

培养基还可分为合成培养基、半合成培养基和复合培养基,合成培养基指的是包含的所有成分为已知的化合物的培养基,复合培养基则是指的包含有酵母或植物或动物提取物的不确定成分的培养基.而实验室中最常用的,则是既包含已知成分又包含未知成分的半合成培养基.

例2： 【9k培养基中】

9是指复极化浓度的KCl (9mmol/L,9K)

就是9K培养基.

除了9K之外还有5k培养基6K培养基

例3： 【MS培养基中的MS什么意思】[生物练习题]

MS是Murashige and Skoog的缩写,MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的,其特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的离子平衡溶液,它的硝酸盐含量高,其养分的数量和比例合适,能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广,多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基.

基于此,这种培养基就用他们的名字来命名了.

例4： 培养基的定义、分类及制备培养基的步骤[生物练习题]

培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等.有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定.

按对培养基的了解分为天然培养基、组合培养基和半组合培养基

按培养基外观的物理状态分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基和脱水培养基

按培养基对微生物的功能分为选择培养基和鉴别培养基

步骤：计算→称量→溶化→调节pH→分装→加棉塞→包扎→灭菌→搁置斜面

计算→称量→溶化→灭菌→倒平板

例5： 培养基里面成分百分之多少是什么意思

培养基一般不是以百分之多少表示的,而是某物质多少克、某某物质多少克……最后加水到多少毫升来表示.

如果个别书籍上出现百分之多少,例如1%,那就称1g,加水到100ml.需要其他量则按比例增减即可.

相关思考练习题：

题1：高中生物：培养基分哪几种？分别作用是啥？

点拨：我带书了，马上给你翻 按照培养基物质： 1、固体培养基，培养可见的菌落，可根据菌落形态用于菌的鉴定、分离等 2、液体培养基，就是大量培养菌... 3、半固体培养基，常用于观察细菌的运动路径、厌氧菌的分离和菌种鉴定等 按照功能： 1、普通培养...

题2：培养基的配制

点拨：1.配料： 配方换算→在容器中加入少量水（蒸馏水，自然水）→按照配方称取各种药品（依次加入）→加足所需水量。 2.溶解： 淀粉溶解：少量冷水调成糊状。加热溶解，边加热边搅拌以防止烧焦。 3.调PH： 用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的...

题3：加富培养基和选择培养基的区别

点拨：加富培养基(enrichment medium) ，也称营养培养基，即在培养基中加入有利于某种微生物生长繁殖所需的营养物质，使这类微生物的增殖速度比其他微生物快，从而使这类微生物能够在混有多种微生物的情况下占优势地位的培养基。 选择性培养基是指根据...

题4：培养基的使用

点拨：固体培养基：实验室用于微生物分离，鉴定；生产中用于发酵生产酒精，酱油等，白酒等，还有蘑菇的生产等。 液体培养基：实验室用于微生物的代谢分析，培养条件的优化等。生产中用于工业发酵生产酒精、柠檬酸、氨基酸、抗生素、维生素等大部分产品...

题5：培养基包括哪些成分，各有什么作用，如何配制

点拨：1 无机营养物 无机营养物即无机盐是植物生长发育所必需的，根据植物对无机盐需要的多少，将其分为大量元素和微量元素。 1.1 大量元素 大量元素在植物体内含量占干物重的0.1-10%，其浓度一般大于0.5mmol/L，包括氮（N）、磷（P）、钾（K）、钙（C...