pgl3
发布日期：2018-12-22 11:58:54编辑：音乐人
概括：这道题是友卧友同学的课后语文练习题，主要是关于pgl3，指导老师为濮老师。背景值，是指在不受外源物质影响的情况下，环境组成的各要素，如大气、水体、岩石、土壤、植物、农作物、水生生物和人体组织中各种化学元素的含量及其基本的化学成分，为背景含量的统计特征值。它反映环境质量的表观原始状态，各地区的背景值不同。目前，在全球环境受到人为干扰的情况下，要寻找绝对不受外源物质影响的背景值，是非常难做到的。因此，背景值实际上只是一个相对的概念，只能是相对不受人为影响情况下环境要素的基本化学组成。
题目：pgl3
解：应该是吧.polyA是II型转录酶的转录终止信号,3’-UTR应该是在polyA之前.
一个酶切位点也不错,你正好可以考察一下3‘UTR正反向插入,mirna对其识别、作用的效果.
参考思路：
这东西，在百度知道难以找到人回答。
举一反三
例1： 如何判断靶某种基因或蛋白是某个miRNA的靶标
思路提示：
有很多生物软件可以预测某个miRNA的靶基因,如TargetScan,mirBase,PicTar,结合miRNA芯片筛选.确定靶蛋白后,通过overexpression或antisense改变该miRNA的表达量,QRT-PCR及Western Blot检测相应蛋白含量的变化；将预测靶蛋白的启动子转载到pGL3载体,转染细胞并检测luciferase的变化倍数；最后通过IP证明两者间的结合
例2： 验证一个miRNA的靶基因需要多少钱
思路提示：
需要很多钱
例3： miRNA靶基因验证时怎么突变靶基因的3‘UTR结合位点
思路提示：
请问miRNA靶基因验证时怎么突变靶基因的3‘UTR结合位点 - 分子...
例如:靶基因和miRNA的结合位点序列为:CAUUUCA,那应该怎么突变,不知道是突变其中一个还是几个碱基.看文献有的只突变1个碱基,有的突变2个碱基,不知道有没有什么
例4： 【为什么miRNA的作用靶点在3‘UTR?为什么miRNA的作用靶点在3‘UTR而不在5’端?这样的话要首先等到DNA转录完毕才能进行抑制,这不是一种物质及能量的浪费吗?如果靶点在5’端是不是就能避免这种】[生物练习题]
思路提示：
首先,你提到了UTR这个概念,但是只有mRNA上才有UTR的定义.如果DNA没有转录,就无所谓UTR.所以无论5’还是3’,都已经是DNA转录之后的事情了.
其次,miRNA属于转录后调控,转录后调控的方式有很多,而且这些调控是不能在转录前进行的.机体是一个精密而复杂的系统,虽然我们现在的科学还不能解释很多东西,但这样的系统是经过自然选择的,必然有他的道理.不能说这些调控方式是浪费.
最后,现在miRNA的机制也并不十分清楚,已经有报道miRNA可以作用于mRNA的5’端甚至coding region.你可以找找相关的文献.
例5： 【通过TargetScan查到的某个miRNA的靶基因,怎样确定这个miRNA与靶基因的关系,如是抑制还是促进基因表达】
思路提示：
找到的都是抑制的 不过是预测的 需要做Luciferase real-time western分别从不同水平验证
相关思考练习题：
题1：pgl2-basic和pgl3-basic的区别
点拨：PGL3 promoter就是用于插入自己的enhancer证明enhancer作用的 PGL3 enhancer是用来插入自己的promoter做promoter实验的，所以promoter实验用pGL3-basic其实也是可以的
题2：PGL3 promoter和enhancer用途上的区别？
点拨：PGL3 promoter就是用于插入自己的enhancer证明enhancer作用的 PGL3 enhancer是用来插入自己的promoter做promoter实验的，所以promoter实验用pGL3-basic其实也是可以的
题3：pgl3-basic载体插入目的片段过长会影响转染吗
点拨：可以下载PGL3-basic Vector的technical mannual (Part# TM033)在第18页上，可以查到一个表格：Table 4. Restriction Enzymes That Cut the pGL3-Basic Vector Between 1 and 5Times.从这个列表上看，这个载体上没有EcoRI的酶切位点，不仅多克隆...
题4：pgl3-control质粒转化后怎么进行鉴定
点拨：那就需要看你的点突变质粒会不会影响荧光素酶的表达。一般情况没有什么影响。具体实验这块就在于你的实验设计以及考察方面了，加油~
题5：我朋友的iphone4S序列号是DNPGL3VVDTD5 如何鉴别是...
点拨：激活信息 最近一次激活时间2011年11月16日 激活卡所属运营商(参考) 中国移动 设备信息 产品型号IPHONE 4S 32GB 黑色 产品序列号(SN) DNPGL3VVDTD5 iOS版本 5.1.1 销售地 美国 销售类型 T2(Apple官网零售非合约机) 购买时间 2011年11月14日 过保...